实时荧光定量PCR仪

Applied Biosystems7500型定量PCR仪主要特点；

● 五色荧光检测,应用更广泛全面，包括：基因表达分析，病原体定量分析，SNP基因型分析以及以阳性内对照为基础的阳性/阴性结果判定

● 新型光路设计支持更多的荧光标记检测，包括：FAM/SYBR Green I, VIC/JOE, NED/TAMRA/Cy3, ROX/Texas Red,和Cy5; 更好的激发光源设计使长波长红色荧光的检测灵敏度大大提高

● 强大灵活的反应板设置指南软件使反应板设置非常方便，先进的实验结果显示与分析工具使实验数据的分析处理更简单直观

● 新型半导体热循环系统支持96孔板和单一0.2ml反应管。

● 将来可以升级至超速定量PCR反应模式，大大缩短定量PCR反应时间

● 体积小，采用手提电脑或台式电脑，适用于任何空间的实验室。

Applied Biosystems7500实时定量PCR主要应用；

实时定量PCR应用广泛，包括基于相对定量分析的基因表达分析，以标准曲线为基础的病原体定量分析，定性的PCR扩增后核酸序列的SNP基因型分析，以及以阳性内对照为基础的阳性/阴性结果判定

快速热循环

7500型实时荧光定量PCR系统的标准模式采用25-100微升反应体积，可以采用96孔板或单管/8联管进行实验反应。另外7500还可以升级为快速热循环样品基座，该升级为选购件，由AB公司工程师负责安装。快速热循环样品基座采用新型96孔反应板，这种反应板的管内液体上方的空间较小，可以支持5-30微升反应体积的实验。采用样品基座升级后的7500，新型96孔反应板和新型快速热循环定量PCR预混试剂，实时定量PCR实验可以在40分钟内完成，实验效果与标准2小时模式**。

实时定量PCR系统分析软件；

7500型实时荧光定量PCR系统软件采用Windows XP操作系统，进行仪器控制，数据收集和数据分析，软件功能强大，界面友好，包括如下特色：

● 反应板设置指南，使实验设计非常简单，即使是复杂的多重定量实验也是如此。

● 扩增反应曲线的实时监测

● 自动设定荧光基线，自动计算荧光阈值使实验结果分析大大简化

● 采用标准曲线进行靶基因的定量

● 基因表达相对定量软件提供强大的分析显示，可以自动将多达10块96孔板基因表达实验的数据同时分析，并自动去除无关项数据，该软件为选购件

● 自动SNP分型软件以直观的图表输出分型结果并自动进行分型质量评分

● 解离曲线数据采集操作简单观察方便，可以在仪器运行时观察解离曲线数据

● 观察实时扩增曲线时可以非常方便的标定所对应的样品孔位置

● 光源使用时间监测及仪器系统自我诊断程序

荧光信号检测:

7500型实时荧光定量PCR系统的全部96个样品孔采用同一卤钨灯作为光源，卤钨灯光通过五色光源滤光片后激发每一个分析样品。卤钨灯光源增加光源滤光片后改善了长波长红色荧光标记的激发效果，可以大大提高红色荧光检测的灵敏度和定量分析的准确性。激发后的荧光再通过五色荧光滤光片到达CCD照相机检测信号。五色荧光滤光片能够有效地分辨包括：FAM/SYBR Green I, VIC/JOE, NED /TAMRA/Cy3, ROX/Texas Red和Cy5在内的多种荧光染料。

主要应用；

基于相对定量分析的基因表达分析

以标准曲线为基础的病原体定量分析

定性的PCR扩增后核酸序列的SNP基因型分析

以阳性内对照为基础的阳性/阴性结果判定

仪器性能；

7500型快速实时荧光定量PCR系统经过验证可以达到如下性能指标：

9个数量级的线性范围；

可以检测20μL反应体积单一报告荧光TaqMan实验中仅10个起始拷贝数的模板，其可置信度高达99.7%。